格列衛/伊馬替尼通過消耗效應調節性T細胞增強腫瘤免疫

　　本報告探討了小分子是否可以消耗表達 FoxP3 的調節性 T (T reg) 細胞，從而增強抗腫瘤免疫力。格列衛/伊馬替尼是一種由慢性髓性白血病 (CML) 細胞表達的致癌 BCR-ABL 蛋白的酪氨酸激酶抑制劑，具有脫靶，包括在 T 細胞中表達的 LCK。我們發現，完全分子緩解 (CMR) 的伊馬替尼治療的 CML 患者表現出效應 T reg (eT reg) 細胞的選擇性耗竭和效應/記憶 CD8+T 細胞的顯著增加，而非 CMR 患者則沒有。CML 治療濃度的伊馬替尼確實在 eT reg 細胞中特異性誘導細胞凋亡并擴大腫瘤抗原特異性 CD8+健康個體和黑色素瘤患者的體外 T 細胞，并在小鼠體內抑制結腸腫瘤的生長。機制上，由于與其他 T 細胞相比，FoxP3 依賴性 T reg 細胞中 LCK 和 ZAP-70 的表達低得多，伊馬替尼對 LCK 的抑制進一步降低了它們的 TCR 信號強度，使它們選擇性地對信號剝奪的凋亡敏感�？傊�，伊馬替尼對 eT reg 細胞的消耗有助于激發對各種癌癥的有效免疫反應。

　　本研究的結果表明，格列衛/伊馬替尼不僅直接殺死表達 BCR-ABL 的白血病細胞，而且在 CML 治療劑量下通過抑制 LCK 選擇性地消耗 eT reg 細胞，從而引發 T 細胞介導的抗腫瘤免疫反應。伊馬替尼對惡性細胞的直接和間接（免疫學）殺傷表明它們對 CML 中的 CMR 誘導具有協同作用。伊馬替尼的這種 T reg 細胞消耗活性也可用于免疫治療其他癌癥。

　　那么格列衛/伊馬替尼對 LCK 的抑制是如何選擇性地殺死 eT reg 細胞的呢？導致選擇性殺傷的一個因素是，與其他 T reg 或 T conv 群體相比，eT reg 細胞在生理上處于高度增殖狀態，這取決于 TCR 信號。LCK 抑制減弱了 TCR 信號，從而在 eT reg 細胞中選擇性地誘導信號剝奪的細胞死亡。T reg 細胞中 TCR 的條件性缺失確實損害了它們的增殖并使它們發生細胞凋亡。eT reg 細胞的活躍增殖在很大程度上歸因于它們的 TCR 庫傾向于識別由 APC 呈遞的自身抗原，以及它們的抗原引發狀態，例如它們高表達各種 T 細胞輔助分子，包括粘附分子。與 T reg 細胞相比，伊馬替尼對 T reg 細胞特異性殺傷的另一個關鍵因素是 T reg 細胞中 LCK 的固有低水平表達，這使得伊馬替尼能夠在相對低的劑量下進一步選擇性地降低 T reg 細胞中的 TCR 信號。FoxP3 依賴性基因抑制似乎是導致這種 T reg 細胞特異性下調 LCK 和 ZAP-70 表達的原因。由于 LCK 和 ZAP-70 是最接近 TCR 的激酶，因此這些激酶的衰減會協同抑制下游 TCR 信號強度。此外，活性 pY394-LCK 的基礎水平對于設置 TCR 信號閾值至關重要。因此，T reg 和 T conv 細胞之間 LCK 的數量和激活狀態的這些固有差異，以及 T reg 細胞的高度增殖性基礎狀態，使得 eT reg 細胞比其他 T 細胞對信號引起的凋亡細胞死亡更敏感伊馬替尼抑制 LCK 時的剝奪。

　　格列衛/伊馬替尼根據治療劑量表現出免疫增強和抑制作用。在 CML 治療劑量下，伊馬替尼選擇性地減少 eT reg 細胞，但在體內和體外保留 CD8+ T 細胞，使后者能夠介導抗腫瘤免疫反應。然而，高于治療劑量（超過 10 μM）的伊馬替尼非選擇性抑制 CD4+和 CD8+的增殖T conv 細胞和 T reg 細胞，殺死它們，從而抑制免疫反應。達沙替尼對 BCR-ABL 和 LCK 的親和力比伊馬替尼高得多（>100 倍），顯示出相似的劑量依賴性效應。在其 CML 治療濃度范圍內，低劑量的達沙替尼 (5–10 nM) 在體外選擇性地抑制 eT reg 增殖，而高劑量 (25–100 nM) 不加選擇地抑制所有 T conv 和 T reg 細胞的增殖。相比之下，比格列衛/伊馬替尼或達沙替尼更特異性地抑制 BCR-ABL 的尼羅替尼在體外 CML 治療劑量范圍內不具有 T reg 細胞特異性差異殺傷作用。這些結果共同表明，包括伊馬替尼、達沙替尼和 AMG-47a 在內的 LCK 抑制劑，但不包括尼羅替尼，在低濃度時選擇性地影響 eT reg 細胞，并且不加選擇地在較高濃度下所有 T 細胞亞群。除了在特定伊馬替尼治療的個體中對 T 細胞亞群的這種劑量依賴性差異影響外，大約一半接受伊馬替尼治療的 CML 患者未能表現出 eT reg 細胞減少并達到 CMR。

　　格列衛/伊馬替尼利用 eT reg 細胞中固有的下調 LCK 活性，這些細胞具有高度增殖和凋亡傾向，選擇性地消耗它們。這種特異性消耗 eT reg 細胞的機制可用于設計新的免疫增強藥物，通過靶向其他 TCR 近端信號分子（如 ZAP-70）選擇性地控制 T reg 細胞，以治療癌癥和慢性感染。此外，在靶向致癌激酶的激酶抑制劑中添加 LCK 抑制活性可能會賦予它們直接和免疫腫瘤殺傷活性，特別是當靶向癌基因通過突變獲得耐藥性時。而且，這種 T reg 細胞消耗藥物的一個優點是，通過監測外周血中的 T reg 細胞數量和組成，可以很容易地評估它們的效果并調整劑量以區分控制 T reg 和 T conv 細胞。因此，消耗 T reg 細胞的小分子可用于治療和預防各種類型的癌癥，并可能用于慢性感染。微信掃描下方二維碼了解更多：