阿法替尼afatinib在膠質母細胞瘤患者中的效果作用良好

　　盡管采取了包括手術、放療和 TMZ（替莫唑胺）在內的積極治療干預措施，但 GBM（膠質母細胞瘤）患者的生存率并沒有顯著提高。大多數 GBM 患者會出現與普遍死亡相關的復發，這表明迫切需要了解這種疾病并開發新的療法來提高患者的生存率。最近的高通量數據分析揭示了 GBM 的遺傳、表觀遺傳和突變特征，為個性化醫療鋪平了道路。許多研究已經確定 EGFR 和突變的 EGFRvIII 在大多數 GBM 患者中被擴增/過表達，因此是重要的治療靶點。雖然成功針對其他癌癥的 EGFR 策略已在 GBM 中進行了測試，但這些臨床試驗在很大程度上令人失望，可能是由于其他 EGFR 家族成員和 RTK的代償性激活。磷酸酶和張力蛋白同源物 (PTEN)，一種 PI3K 信號傳導的負調節劑，也已被證明會影響 EGFR 靶向治療結果。所以就會使用阿法替尼（afatinib）進行后續療效監督。

　　GBM SP/CSCs 通過 HER2 和 HER3 的代償性上調顯示對抗 EGFR 療法的抗性。有趣的是，添加拉帕替尼（抑制 EGFR 和 HER2）降低了 SP/CSCs。因此，需要針對并發信號通路的新療法來改善 GBM 患者的預后。與這一概念一致，最近顯示厄洛替尼和 HGF 清除抗體 L2G7 的組合在 EGFRvIII/cMET+/HGF+/PTEN-/-膠質瘤模型中與單一藥物相比顯著降低腫瘤生長并改善 OS。在此，我們研究了阿法替尼和 TMZ 組合在體外和體內過表達 EGFRvIII 的 GBM 模型中的功效。我們的研究表明，這些藥物一起通過在體外誘導表達 EGFRvIII 的 GBM 細胞的G2 /M 停滯和衰老來抑制增殖、錨定依賴性和非依賴性生長。此外，阿法替尼與 TMZ 協同抑制侵襲和運動，可能是通過抑制表達 EGFRvIII 的 GBM 細胞中的 JAK2/STAT3 和 FAK 信號傳導。這種組合還抑制了 cMET 的交叉激活并減少了 GBM SP/CSC。值得注意的是，我們的研究表明，在原位顱內模型中，阿法替尼和 TMZ 一起不僅可以降低腫瘤負荷，還可以抑制腫瘤生長。

　　GBM 具有高度侵襲性，經常浸潤/侵入周圍正常腦組織，阻礙完全手術切除并導致進展。先前已經證明，EGFRvIII 信號傳導可以激活 JAK2/STAT3 信號傳導，并且用 JAK2 抑制劑或 siRNA 抑制 JAK2 可降低體外和體內 EGFRvIII 細胞的侵襲性。表明 JAK2 信號傳導在具有 EGFR 激活突變的肺癌細胞中對厄洛替尼產生獲得性耐藥中起重要作用。我們的研究顯示阿法替尼完全抑制 EGFRvIII 介導的 JAK2 信號傳導。重要的是，與厄洛替尼相比，阿法替尼顯示出對 EGFRvIII 信號傳導的長期抑制，這表明阿法替尼在預防 JAK2 介導的致瘤信號傳導方面具有卓越的功效。除了 JAK2 激活，EGFR 介導的 FAK 磷酸化 (Y925) 和激活也促進癌細胞的遷移和侵襲。與這些結果一致，我們的研究表明 U87EGFRvIII 細胞比 U87 細胞具有升高的 pFAK (Y925) 水平和更大的侵襲潛力。值得注意的是，阿法替尼治療完全消除了 EGFRvIII 介導的 FAK (Y925) 激活/磷酸化、GBM 細胞遷移和侵襲。

　　癌癥干細胞通過對 CRT 的內在和獲得性抗性參與腫瘤進展。包括 EGFR 在內的許多信號通路都參與了 CSC 的維持。最近，EGFRvIII 被證明可以交叉激活 cMET RTK并豐富 GBM CSC。使用乳腺癌細胞系 MDA-MB-453 和 GBM 細胞系 U-373，用 cMET 受體配體肝細胞生長因子/分散因子處理顯示可賦予對阿霉素/阿霉素和順鉑的抗性。此外，siRNA 或藥理學抑制劑 SU11274 對 cMET 的抑制減少了體外幾種 GBM CSC 中的腫瘤球形成。此外，脂質體結合的 cMET siRNA 還降低了原位小鼠模型中 GBM 腫瘤的生長。與這些結果和我們之前在頭頸部鱗狀細胞癌中的結果一致，我們觀察到使用阿法替尼可顯著減少 CSC。在這里，我們最終確定阿法替尼通過消除 EGFRvIII-cMET 信號傳導來減少 CSC。

　　最近的一項研究表明，cMET 抑制劑克唑替尼與厄洛替尼的組合顯著降低了人類 GBM 異種移植物的干細胞標志物表達、神經球生長和體內腫瘤生長。雖然這種組合減少了皮下異種移植腫瘤的生長，但克唑替尼通過 BBB 的非滲透性限制了腦腫瘤臨床前和臨床模型中的療效。研究表明，BBB 不僅限制了克唑替尼，而且限制了大多數化療藥物對腦腫瘤的可用性，并限制了它們的治療效果。然而，最近一項針對 NSCLC 和軟腦膜癌病患者的前瞻性多中心研究顯示阿法替尼具有顯著益處，盡管只有 2.45 ± 2.91% 的阿法替尼從血液中滲透到 CSF。我們的研究表明，單獨使用阿法替尼對 U87EGFRvIII 直立移植小鼠的腫瘤生長和存活沒有影響。

　　療效降低可能是由于我們研究中使用的阿法替尼劑量較低，而非 NSCLC 腦轉移模型中使用的較高劑量導致腫瘤消退。盡管 TMZ 在該模型中減少了生長和總體腫瘤負荷，但 60% (4/7) 的動物經歷了腫瘤再生長，表明其作為單一療法的局限性。相比之下，阿法替尼和 TMZ 一起顯著降低了腫瘤生長并完全阻止了腫瘤再生長的發展 (5/5)。幾項研究表明，化療藥物會殺死大部分分化的腫瘤細胞，但會富集 SP/CSC，導致腫瘤再生長。我們的結果與這些報告一致，因為 EGFRvIII 腫瘤異種移植物在 TMZ 治療后顯示 CSC 標志物顯著上調，但在阿法替尼和 TMZ 聯合治療的小鼠中這些標志物顯著下調。更多詳情可咨詢下方微信。