達克替尼(dacomitinib)提高對順鉑耐藥的人卵巢癌的化學敏感性

　　耐藥性阻礙了人類卵巢癌 (OC) 療法的有效性，例如順鉑或紫杉醇療法。盡管達克替尼（dacomitinib）是一種新型抗癌劑，可用于治療多種類型的癌癥，例如非小細胞肺癌、頭頸癌，但很少有研究報告其在耐藥人類 OC 細胞中的有效性。在本研究中，將愈合、微孔板分光光度計分析、流式細胞術分析、蛋白質印跡和基因表達綜合（GEO）分析用于檢測達克替尼和順鉑在人OC SKOV-3或OV-4細胞中的協同作用。達克替尼和順鉑的共同給藥顯著降低了耐藥性 OC 細胞的活力并促進了細胞凋亡。此外，在順鉑耐藥的 OC 細胞中，達克替尼增加鈣粘蛋白 1 (CDH1) 水平并降低 P-糖蛋白 (P-GP) 水平。此外，GEO 分析表明，達克替尼抑制了表皮生長因子受體 (EGFR) 信號通路�？傊�，達克替尼通過調節 CDH1 和 P-GP 蛋白水平并抑制 EGFR 信號通路來提高順鉑在人 OC 中的化學敏感性。

　　OC 藥物的特點是療效低。我們之前的研究結果表明，達克替尼可減少 OC 細胞的遷移。此外，在本研究中，達科替尼治療顯示順鉑耐藥 OC 細胞的遷移顯著減少。應進行進一步的 transwell 檢測以確認傷口愈合檢測的結果。目前的研究結果表明，達克替尼降低了 OC 順鉑耐藥細胞中 EGFR 和 P-GP 的表達。此外，在本研究中，使用 GEO 分析和 String webserver 預測了 EGFR 低表達樣品的 OC 中重要的信號通路。然而，在未來的研究中，應在達克替尼治療后使用功能測定來確認這些候選基因在 OC 中的作用。

　　達克替尼（dacomitinib）是一種 EGFR (HER1)、HER2 和 HER4 的小分子抑制劑。達克替尼對多種耐藥癌細胞具有很高的細胞毒性，例如 EGFR 抑制劑吉非替尼和厄洛替尼。達克替尼增加 CDH1 并降低 SLUG 表達水平。CDH1 和 SLUG 蛋白是重要的 EMT 相關蛋白 。EMT 相關蛋白在包括 OC 細胞在內的不同癌細胞的遷移中發揮重要作用。在 EMT 期間，上皮型癌細胞發生分子（表觀遺傳變化）、形態（生物力學力）和功能變化（侵襲能力）。CDH1 的高表達水平是一種非惡性腫瘤標志物，而 SLUG 與 CDH1 的啟動子結合并抑制 CDH1 的表達。上述研究提供的證據表明，達克替尼通過調節 CDH1 和 SLUG 表達水平來抑制 OC 細胞的生長。

　　在本研究中，為了確定達克替尼（dacomitinib）在耐藥 OC 細胞中的有效性，首先將細胞暴露于不同濃度的順鉑。然后用達克替尼處理順鉑耐藥細胞。在本研究中，與單用順鉑處理 OC 細胞相比，達克替尼在暴露于高濃度順鉑的細胞中表現出顯著的凋亡作用。這意味著達克替尼和順鉑的組合對 OC 患者具有協同作用。達克替尼殺死耐藥性 OC 細胞的作用機制目前尚不清楚。

　　P-GP (ABCB1) 是一種 170 kDa 跨膜蛋白，從MDR1基因座表達，并與多重耐藥性有關。之前的一項薈萃分析表明，EGFR 的高表達與 OC 患者的較差生存率相關，而 P-GP 的高表達與順鉑耐藥有關。因此，本研究選擇EGFR和P-GP來探索達克替尼在耐藥細胞中的作用。在本研究中，在 SKOV3-DDP 中觀察到 EGFR 和 P-GP 的高表達，但在 SKOV3 細胞中沒有。本研究的結果暗示EGFR和P-GP可能參與耐藥性的進展。最近的一項研究報告了 EGFR 的抑制可逆轉 OC 中的順鉑耐藥性。順鉑通過靶向蛋白激酶 G (PKG)發揮其活性。PKG2 的過表達可能會抑制 OC 中 EGFR 的表達和磷酸化。順鉑可以調節 PKG2 以進一步抑制 OC 中的 EGFR，但其確切機制需要探索。在本研究中，達克替尼治療降低了 SKOV3-DDP 細胞中 EGFR 和 P-GP 的表達。因此，達克替尼可能通過調節 EGFR 和 P-GP 的表達來提高 OC 細胞中順鉑的化學敏感性。

　　達克替尼（dacomitinib）處理的 OC 樣本可在 GEO 數據庫中獲得。在本研究中，蛋白質印跡表明達克替尼顯著降低了 EGFR 的表達。在本研究中，用其他抑制劑處理的樣本與用達克替尼處理的細胞具有相似的 RNA 譜。本研究的結果揭示了 OC 進展中的重要信號通路，例如調節細胞粘附、細胞外區域部分、囊泡、膜結合囊泡、細胞外空間和谷胱甘肽代謝信號通路。抑制 EGFR 表達會抑制細胞粘附信號通路。達克替尼可能是 OC 患者的一種潛在療法。

　　本研究有幾個局限性。首先, 沒有使用 transwell 入侵檢測, 應在未來的研究中進行。其次，沒有使用碘化丙啶來評估用達克替尼和順鉑處理的細胞的凋亡。在本研究中沒有進行體內測定。未來的研究應該進行這些以驗證本研究的體外發現。

　　總之，本研究表明，達克替尼（dacomitinib）通過調節 CDH1 和 P-GP 的蛋白質表達來抑制人 OC 細胞活力。此外，它降低了 EGFR 信號通路的活性，從而提高了順鉑耐藥 OC 細胞的化學敏感性。應進行進一步的研究以探索達克替尼對 OC 發展的影響的具體機制。微信掃描下方二維碼了解更多：